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单克隆抗体的纯化技术性操作流程

时间:2021-6-22 3:00:00  来源:http://www.saiboerbio.com/news636134.html

单克隆抗体的纯化技术性操作流程


从细胞培养液或腹腔积水得到 的单克隆抗体,不用纯化就可以运用于日常确诊或定性分析法。假如用以免疫力标识测量,须分离出来和纯化。可以用半饱和、饱和状态硫酸铵开展沉积,开展基本浓缩和纯化;可以用亲和层析法进一步纯化。


一、腹水型单克隆抗体的纯化


在单抗纯化以前,一般均需对腹水开展预备处理,目地是为了更好地进一步去除体细胞以及沉渣、小颗粒化学物质、及其人体脂肪滴等。常见的方式 有二氧化硅吸附法和过虑离心法,以前面一种解决实际效果为宜,并且实际操作简单。


1、二氧化硅吸附法


2、过虑离心法


用微孔滤膜过虑腹水,以去除很大的稠状及人体脂肪滴;用10000g 15分钟髙速抽滤(4℃)去除体细胞沉渣及小颗粒化学物质。

3、混合法


即以上两法的组成,先将腹水髙速抽滤,取上清液再用二氧化硅吸附解决。


单克隆抗体纯化的方式 :单克隆抗体纯化的方式 有很多种多样,应依据实际单抗的特点和试验标准挑选适合的方式 ,常见的技术性有DEAE离子交换法层析柱、疑胶过滤法和亲和层析法三种。

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